五月婷婷综合基地,中文字幕在线乱码免费毛片,欧美日韩影视,亚洲日本一区二区三区高清在线,美女穿白丝露白色内裤,美女的全部奶,久久dvd

中國(guó)生化試劑網(wǎng)_都萊生物
  • 試劑百科

    • 酶制劑百科大全

    • 各類試劑作用及使用說明

 

    點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息

    點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息

    點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息

 

    淘寶旺旺

    都萊生物

 

谷氨酸脫氫酶(Glutamate Dehydrogenase)的活性檢測(cè)方法

1. 目的

本程序是為了建立谷氨酸脫氫酶(Glutamate Dehydrogenase)的活性檢測(cè)方法,適用于GLDH成品的活性檢測(cè)。

2. 范圍

  適用于GLDH成品、半成品及其他樣品的檢測(cè)。

4. 定義

   U: 在pH7.3, 37度的環(huán)境下, 每分鐘轉(zhuǎn)化1umolα-酮戊二酸變成L-谷氨酸所需要的酶量。

   活性: 每毫升樣品中的活性值。

   比活: 每毫克蛋白的活性值。

5. 內(nèi)容

5.1原理

α-Ketoglutarate + NH3 + NADH + H+        L-Glutamate+ NAD+ +H2O

NADH的消耗可以通過340nm的光吸收進(jìn)行檢測(cè)。

5.2試劑:

A  0.1 M Tris-HCl 緩沖液, pH 8.3

B  1.5M NH4Cl溶液

C  0.225M α-酮戊二酸溶液(pH 7.0-9.0)

D  7.5mM NADH溶液

E   酶稀釋液: 0.1 M Tris-HCl 緩沖液, pH 8.3

試劑的配制方法詳見各試劑配制記錄,配制人員需完整填寫配制記錄。

5.3 操作規(guī)程:

5.3.1儀器參數(shù)設(shè)定

若儀器中無已保存參數(shù),按以下參數(shù)設(shè)定。若已有相關(guān)參數(shù),調(diào)取后確認(rèn)。

檢測(cè)方法:動(dòng)力學(xué)掃描

測(cè)量波長(zhǎng):340nm         測(cè)量時(shí)間:180s

延遲時(shí)間:60s            積分時(shí)間:120s

系數(shù)/因子:6.776          測(cè)量溫度:30±1℃

5.3.2 樣品準(zhǔn)備

若待測(cè)樣品為固體,可以按10mg 樣品/1000ul 超純水比例溶解。溶解后于2-8度放置30min。

5.3.3 檢測(cè)方法

5.3.3.1 在石英比色皿中加入2.5ml 試劑A, 200ul試劑B,100ul 試劑C, 100ul D于30度孵育2min。

5.3.3.2 加入50ul 樣品后, 溫和混勻后開始測(cè)定。

5.3.3.3 測(cè)定結(jié)束后,記錄相應(yīng)數(shù)值:起始讀數(shù)、△A/min test、活性值(U/ml)。

5.3.3.4 活性值(U/ml)范圍為0.1-0.3U/ml,若超出范圍,待測(cè)樣品需經(jīng)試劑D稀釋后再次進(jìn)行檢測(cè)。

5.3.3.5測(cè)定樣品前需檢測(cè)空白反應(yīng)值,即其他操作不變,用500ul E代替樣品加入比色皿后進(jìn)行反應(yīng),測(cè)定△A/min blank。

5.3.3.6計(jì)算公式  活性(U/ml) =(△A/min test-△A/min blank)×6.776×df (稀釋倍數(shù))

5.4 成品檢測(cè)結(jié)果精密度要求:每個(gè)樣品檢測(cè)時(shí),在線性范圍內(nèi)選擇三個(gè)不同的稀釋度進(jìn)行測(cè)定,得到的原液/粉末活性,計(jì)算Cv值,Cv值得要求為<5%,達(dá)到要求后,此次測(cè)定的結(jié)果認(rèn)為有效, 取三個(gè)檢測(cè)數(shù)值的平均數(shù)作為最終的檢測(cè)數(shù)值。若不能達(dá)到,對(duì)此三個(gè)稀釋應(yīng)進(jìn)行重新檢測(cè)。

此方法僅作為參考!

下一條: 稀土金屬化合物有沒有磁性
中國(guó)試劑網(wǎng)_都萊生物
生物試劑|生化試劑|南京生化試劑|生化試劑公司|生化試劑網(wǎng) -CAS號(hào)查詢 Copyright ? 2005-2019 南京都萊生物技術(shù)有限公司

地 址:南京市江北新區(qū)文景路61號(hào)創(chuàng)芯匯2棟503室 ; 電話:025-84699383 84699415 18013301593 18051981593 13382013204

傳真:分機(jī):8003;郵箱:njduly@126.com

蘇ICP備12047475號(hào)  技術(shù)支持:無憂建站

 
城固县| 神农架林区| 华阴市| 安仁县| 禹州市| 丁青县| 鹤庆县| 卓尼县| 冷水江市| 黄冈市| 庐江县| 安宁市| 建昌县| 扎兰屯市| 大理市| 时尚| 北安市| 罗定市| 土默特右旗| 绥芬河市| 洛浦县| 宣化县| 巫山县| 霞浦县| 简阳市| 慈利县| 吴川市| 普格县| 西畴县| 和林格尔县| 淅川县| 三穗县| 什邡市| 恩平市| 宜州市| 内黄县| 旬邑县| 齐齐哈尔市| 大姚县| 永寿县| 陇南市|